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El sistema HPLC está diseñado para realizar análisis químicos de compuestos con el fin de separarlos, identificarlos y cuantificarlos cuando se pasan a través de la columna. Esto se logra detectando y midiendo la respuesta de cada compuesto en la mezcla de la muestra a medida que eluyen de la columna. Los datos resultantes se pueden presentar en un gráfico de cromatografía o en un informe numérico.
Sistemas HPLC modificados:
Según la dirección del flujo de la fase móvil:
Caudal:
La velocidad a la que se suministra el agua se mide en mililitros por minuto (mL/min). El caudal típico oscila entre 1 y 5 mL/min. Varía en función del tipo de bomba utilizada y del propósito del sistema de agua.
Volumen del depósito:
Es la cantidad de agua que contiene el sistema, que se expresa en litros (L) o mililitros (mL). Un pequeño sistema de agua HPLC tiene un volumen de depósito estándar de 1 litro. Los sistemas más grandes, como la ósmosis inversa o central, pueden contener hasta 1000 litros.
Método de purificación:
Los métodos disponibles son el intercambio iónico, la destilación y la filtración desionizada, entre otros. Cada uno de ellos garantiza la eliminación de contaminantes del agua utilizada para el análisis HPLC.
Además de las especificaciones anteriores, existen otros componentes esenciales, como
Pre-filtros:
Se utilizan para eliminar las partículas más grandes y las impurezas, como el cloro, del agua antes de su purificación. Ayudan a prolongar la vida útil de los filtros posteriores al mitigar la carga sobre ellos.
Resinas de desionización (DI):
Funcionan intercambiando iones para eliminar sustancias iónicas disueltas, incluidas sales y minerales. Este proceso da como resultado la producción de agua altamente purificada con un bajo nivel de conductividad.
Filtración por membrana:
Este método utiliza membranas semipermeables para separar las impurezas, como la ósmosis inversa, que elimina eficazmente hasta el 99% de los sólidos disueltos y los contaminantes.
Para un funcionamiento óptimo y un rendimiento máximo, es necesario realizar un mantenimiento periódico del sistema de agua HPLC. Aquí tienes algunas prácticas de mantenimiento regulares que debes llevar a cabo para garantizar que su eficiencia se mantenga intacta.
Cambios de filtro regulares:
Es importante cambiar los filtros del sistema de agua en el momento adecuado para garantizar que las impurezas se eliminan eficazmente y para evitar cualquier posible contaminación de las muestras durante el proceso de análisis. Normalmente, la frecuencia de cambio de los filtros en un sistema de agua HPLC varía en función del volumen de agua purificada diariamente, el nivel de contaminantes presentes en el agua de origen y el tipo específico de filtro utilizado.
Limpieza del sistema:
La limpieza del sistema de purificación de agua HPLC ayuda a evitar la acumulación de residuos, contaminantes y biopelículas que pueden acumularse con el tiempo durante el proceso.
Monitorización:
Es bueno comprobar periódicamente los parámetros clave y los indicadores de rendimiento del sistema de agua HPLC. Esto ayuda a garantizar que el sistema funciona de forma óptima.
Industria farmacéutica:
En el ámbito de la industria farmacéutica, la pureza y la seguridad de los medicamentos son supremas. La HPLC es un guardián firme que disecciona meticulosamente los compuestos de los medicamentos y sus interacciones dentro del cuerpo humano. Al dilucidar cómo se comportan los medicamentos en nuestro interior, los sistemas HPLC se vuelven indispensables en el descubrimiento y el desarrollo de medicamentos, asegurando que cada píldora que tomamos sea eficaz y segura.
Control de calidad de alimentos y bebidas:
El mundo de los alimentos y las bebidas que consumimos es complejo, con una serie de productos químicos, conservantes y aditivos ocultos en su interior. Los sistemas de agua HPLC revelan estos componentes ocultos, lo que nos permite tomar decisiones informadas sobre lo que ingerimos. Además, los dispositivos HPLC controlan la presencia de sustancias nocivas como pesticidas y toxinas, salvaguardando nuestra salud y bienestar.
Vigilancia medioambiental:
Nuestro planeta se enfrenta a desafíos sin precedentes, y la contaminación supone una grave amenaza para nuestros ecosistemas. Los dispositivos HPLC desempeñan un papel vital en la vigilancia medioambiental mediante la detección de contaminantes en el aire, el suelo y el agua. Al identificar los agentes tóxicos que dañan nuestro entorno, la HPLC contribuye a la protección del medio ambiente y a la preservación de nuestro patrimonio natural.
Ciencias forenses:
Cuando se comete un delito, cada detalle es importante. En las ciencias forenses, los sistemas HPLC son herramientas invaluables para desentrañar misterios criminales. Examinan pruebas vestigiales como drogas, toxinas y productos químicos encontrados en las escenas del crimen, ayudando a identificar a los culpables y llevarlos ante la justicia. Los dispositivos HPLC asisten así a los investigadores y mejoran la precisión de los análisis forenses.
Investigación clínica:
La investigación médica busca constantemente formas innovadoras de mejorar la asistencia sanitaria. Los sistemas HPLC desempeñan un papel fundamental en la investigación clínica mediante el análisis de muestras biológicas como sangre, orina y tejidos. Este análisis proporciona datos cruciales para comprender las enfermedades, desarrollar pruebas de diagnóstico y evaluar la eficacia terapéutica. La HPLC contribuye significativamente al avance del conocimiento médico y a la transformación de la atención al paciente.
Los filtros de agua para sistemas HPLC comerciales utilizan una variedad de métodos para eliminar los contaminantes. Esto incluye los procesos de ósmosis inversa (RO) y desionización (DI). También pueden incluir filtros de carbón y esterilización con luz ultravioleta (UV). Los compradores deben seleccionar el sistema de agua HPLC en función de las necesidades específicas de su laboratorio.
Requisitos de pureza:
El primer factor a considerar es el nivel de pureza del agua que se necesita para aplicaciones particulares. Si el objetivo es obtener agua de calidad analítica, entonces se debe elegir un sistema que realice más que simplemente eliminar los iones grandes. Esto significa optar por un modelo que también elimine las pequeñas moléculas orgánicas y los contaminantes microbiológicos.
Capacidad de producción:
A continuación, piense en la cantidad de agua pura que el sistema tiene que producir cada día. Asegúrese de que la máquina puede suministrar suficiente agua para las tareas cotidianas sin detenerse o funcionar lentamente. Debe satisfacer las demandas de uso máximo, especialmente durante los períodos de máxima actividad o cuando sea necesario agua adicional para algunos experimentos.
Tiempo de retención:
Considere la cantidad de tiempo que las muestras se conservarán en el sistema de agua antes de ser analizadas. Esto es importante porque algunos sistemas tienen tiempos de retención más largos que otros, lo que puede afectar la estabilidad y la integridad de las muestras.
Requisitos de mantenimiento:
Elija un sistema cuyos requisitos de mantenimiento coincidan con los recursos y las capacidades del laboratorio. Piense en la frecuencia de los cambios de filtro, la necesidad de una saneamiento periódico del sistema y la disponibilidad de asistencia técnica para cualquier reparación o mantenimiento necesario.
P1: ¿Cuál es el propósito del agua HPLC?
A1: El agua HPLC sirve como disolvente para la disolución de la muestra y la formulación de la fase móvil. Su alta pureza minimiza las interferencias, asegurando lecturas de línea de base claras y picos precisos atribuidos únicamente a los analitos. Además, se utiliza para limpiar el aparato para evitar contaminantes que puedan afectar a los resultados.
P2: ¿Por qué es importante que el agua HPLC no contenga iones?
A2: Las sustancias iónicas en el agua HPLC pueden introducir impurezas que conducen a la conductividad, dañando potencialmente los delicados instrumentos y detectores utilizados en la cromatografía líquida de alta eficacia (HPLC). Esto puede provocar que el sistema HPLC proporcione resultados erróneos o una vida útil más corta.
P3: ¿Por qué no se utiliza agua destilada en HPLC?
A3: El agua destilada puede contener niveles residuales de compuestos orgánicos y sustancias volátiles residuales del proceso de destilación. Es más seguro utilizar agua específicamente diseñada para HPLC que ha sido sometida a un tratamiento adicional para eliminar estas impurezas.
P4: ¿Qué tipos de agua son adecuados para HPLC?
A4: Los tipos de agua adecuados para HPLC incluyen los siguientes: agua purificada según la USP, agua para inyección (WFI) y agua del sistema Milli-Q (o su equivalente). Los usuarios de HPLC deben consultar siempre con el fabricante del instrumento para saber qué tipo de agua es adecuado para su equipo.